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《规定》明确，在非机动车道内行驶时最高时速超过十五公里，禁止以手持方式使用通讯工具、浏览电子设备以及吸烟、饮食等妨碍安全驾驶的行为；禁止电动自行车在高速公路、城市快速路、内环路及其放射线、过江隧道、人行道，未设置独立非机动车道的路肩、桥梁、隧道、高架路、立交桥以及其他禁止通行的道路行驶。市、区人民政府可以依法对电动自行车限制、禁止通行的道路作出规定。
公安机关交通管理部门通过交通技术监控记录的电动自行车道路交通违法行为，应当通知电动自行车所有人在规定期限内接受调查、处理；电动自行车所有人将电动自行车交由他人驾驶的，应当告知驾驶人接受调查、处理。公安机关交通管理部门可以使用符合规定的测速仪等设备，收集、固定电动自行车超速行驶等道路交通违法行为的证据。
《规定》还明确，市人民政府根据城市道路交通发展状况和发展导向，综合考虑交通出行合理需求，可以对电动自行车实行总量控制。同时，交通运输、公安机关交通管理等行政管理部门应当结合电动自行车通行特点，在道路具备条件的情况下，设置非机动车道，完善非机动车信号灯、标志标线等交通设施。新建、扩建道路，建设单位应当按照相关规范设置非机动车道。
相关数据显示，2022年以来，广州市公安交警部门每年查处电动自行车交通违法都超过100万宗。2023年以来，因电动自行车超速造成的交通事故高达1500多起，导致数百人受伤、数十人死亡。各大医院创伤骨科患者中的60%至80%，都是因电动自行车超速等交通意外造成的。2024年6月至8月，两个月间广州就发生电动自行车火灾近300起。